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腊八虽过,干货依旧:看过来,十全大补ELISA知识盘点

发布时间:2020年01月12日 浏览次数:147

听说昨天的腊八节大家吃的是热火朝天,腊八粥,八宝茶,腊八豆腐,腊八面“齐聚一堂“。

 

营养丰富的美食温暖了大家的胃,那Abbkine就负责给大家送点精神食粮,各种ELISA实验知识大盘点,增加大家的知识财富。

 ELISA实验简介

定义:Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测。

目的:为实验提供准确可靠的定量分析实验依据,为了保证实验数据的可靠性,在实验过程中必须坚持全面质量控制和全过程质量控制。在收集标本前都必须有一个完整的计划。

ELIKINE试剂盒优势:一、高效、灵敏、特异的抗体;二、定量准确稳定的重复性和可靠性;三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;五、节省实验经费。

ELISA实验试剂、仪器

ELISA样本处理

标本类型:

ELISA常见的标本- -般包括:液体类标本(包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等) ; 培养细胞;组织标本。这些标本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。

  1. 血清:全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。
  2. 血浆:抗凝剂推荐使用EDTA-2Na,样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。避免使用溶血,高血脂样品。
  3. 组织匀浆:用预冷的匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
  4. 细胞培养上清:取细胞培养上清于1000×g离心20分钟,除去杂质及细胞碎片。取上清检测。
  5. 其它生物样品:如固体生物代谢物,按组织样本处理方法操作,悬浮物应离心去除。

 

样本保存时间 保存方法
1周内检测 保存于4℃
1个月内检测 按一次使用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融
6个月内检测 分装保存于-80℃,避免反复冻融

 

ELISA方法类型对比

 

类型 检测对象 适用范围 试剂盒特征 举例
竞争法 测抗原 小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点,因此不能用双抗体夹心法进行测定,可以采用竞争法模式。 小分子激素、药物等ELISA测定多用此法。 KET0001
EliKine™ Testosterone ELISA Kit
间接法 测抗体 间接法的优点是只要变换包被抗原就可利用同- -酶标抗抗体建立检测相应抗体的方法。间接法成功的关键在于抗原的纯度。 对IgG, IgM, IgA, IgE, Ig等指标的测定常用此法。 KTE62862
Human Anti-HBs IgG ELISA Kit
双抗体夹心法 测抗原 适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。 检各种蛋白质等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、 AFP、hCG等 KTE100939
Rat Anti-streptolysin O IgG antibody ELISA Kit
双抗原夹心法 测抗体 用特异性抗原进行包被和制备酶结合物,以检测相应的抗体。与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体。此法中受检标本不需稀释,可直接用于测定,因此其敏感度相对高于间接法。 名称带有Antibody等字样的试剂盒 KTE62860 Human Cholera antibody ELISA Kit

 

三大类型ELISA实验步骤大集锦:

 

 

 

 

加样移液方法:

以上步骤是以KET9007 EliKine™ Rat TNF-α ELISA Kit为例进行描述。

 

洗板方法

任何一个成功的ELISA检测,正确的洗板方法是非常关键和重要的方面。连贯的洗板也是很有必要的。在稀释浓缩洗涤液时,请使用去离子水或者蒸馏水。

 

 

 

 

 

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