科研达人手把手教你如何选择超优性价比的抗体&蛋白偶联试剂盒

一：通俗定义偶联技术

将酶、生物素、荧光素、琼脂糖、磁珠等一些易于检测或易于分离的物质，用一定的技术共价标记或缀合到抗体、蛋白质或其它小分子物质上。

二：偶联技术产生背景

抗体、蛋白质或其它小分子的偶联是许多类型的生物学实验的必要步骤。比如：为了在免疫测定（比如WB/IHC/IF等免疫学实验）中进行特异性蛋白的检测，我们将一抗或者二抗上偶联上酶、荧光素等；

在细胞染色（生物成像）应用中，将活性染料（荧光素）直接与细胞外或细胞内的蛋白（多肽）结合，以产生可见且可测量的染色；

将蛋白质或抗体上偶联琼脂糖或磁珠，提供了靶向纯化的方法。比如，Abbkine用于IP实验的琼脂糖（磁珠）偶联的抗体，直接省去了ProteinA/G的使用。

三：各品牌偶联试剂盒大揭秘（以HRP偶联试剂盒和绿色荧光偶联试剂盒为例）

1. HRP偶联试剂盒

* Abbkine HRP偶联试剂盒如何从结合抗体中去游离HRP（分子量40KD）？

Abbkine HRP偶联试剂盒在设计时，已经考虑到这点。试剂盒可在反应结束时提供低水平的游离HRP。因此，不需要过滤步骤，试剂盒中提供的终止液会封闭游离HRP的反应基团；

* ThermoFisher品牌中Protein A/G柱子的作用是去除游离的HRP。

2. 绿色荧光偶联试剂盒

* 纯化柱的目的是要把未偶联的染料和偶联产物分开，因为染料都是小分子（分子量1KD左右），Abbkine提供的纯化柱体积是50KDa, 0.5 ml；ThermoFisher提供的纯化柱也是针对抗体（抗体分子量160KD左右）的纯化。如果客户纯化的蛋白分子量小或者很大，需要自己配备合适的超滤管。

超滤管配备建议如下：

综上所述，你会选择哪个品牌的偶联试剂盒呢？作为Abbkine的铁粉，我再额外总结下Abbkine LinKine™偶联系列产品特点&优势:

• 优化的方案 -遵循标准实验流程，凭借优异的预活化的染料，蛋白质比率和专利溶液配方，以获得最佳活性或者荧光。
• 操作简便- 三步操作即可实现，将偶联基团结合到抗体或者其它蛋白的伯胺位点上。
• 定制化 -改变摩尔比，反应缓冲液和pH值，以及其它参数，可实现不同水平的偶联和活性。
• 高效纯化 - 试剂盒包括纯化柱，确保快速有效地去除未反应的染料和优异的蛋白质/抗体回收。