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CCK-8细胞增殖/毒性检测试剂盒:细胞分析旗舰产品

发布时间:2020年02月17日 浏览次数:327

Cell Counting Kit-8简称CCK-8试剂盒,是一种基于WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),适用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。

图:CCK-8(WST-8)反应机制

实验原理:

WST-8属于MTT的升级产品,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物(formazan)。颜色的深浅与细胞的增殖成正比,与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450mM波长处测定OD值,间接反映活细胞数量。

用途:

CCK-8法应用非常广泛,如药物筛选、细胞增  殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。

为什么将Cell Counting Kit (CCK-8) 作为细胞增殖与毒性检测最佳选择:如下表,CCK-8法与其他细胞增殖/毒性检测方法的优势比较,结果不言而喻!

检测方法 MTT法 XTT法 WST-1法 CCK-8法
甲臜产物的水溶性 差(需加有机溶剂溶解后再检测)
产品性状 粉末 2瓶溶液 溶液 1瓶溶液
使用方法 配成溶液后使用 现配现用 即开即用 即开即用
检测灵敏度 很高 很高
检测时间 较长 较短 较短 最短
检测波长 560-600nm 420-480nm 420-480nm 430-490nm
细胞毒性 高,细胞形态完全消失 很低,细胞形态不变 很低,细胞形态不变 很低,细胞形态不变
试剂稳定性 一般 较差 一般 很好
批量样品检测 可以 非常适合 非常适合 非常适合
便捷程度 一般 便捷 便捷 非常便捷

* 细胞毒性非常低,因此加入WST-8显色后,可以在不同时间反复用酶标仪读数从而找到最佳测定时间。

* 酚红和血清对CCK法的检测不会造成干扰(扣除空白孔即可)。

如何选择合适的CCK-8检测试剂盒?

目前市面上能提供的【CCK-8】细胞增殖/毒性检测试剂盒有国产分装或原产的,国产分装的CCK-8试剂盒在质量稳定性上有不足。而原产于国内实验室的CCK-8试剂盒有些具有较好的检测结果,在批次之间的稳定性上较难控制。至于原装进口供应CCK-8试剂盒的进口品牌并不多,就连Abcam、Thermo,Sigma等等几个品牌都不能够提供CCK-8试剂盒,而其它品牌在性价比上远逊于Abbkine产品。

作为Abbkine品牌旗下首款细胞分析旗舰产品,Cell Counting Kit (CCK-8),Abbkine研发工程师为其倾注了大量的投入,不断摸索优化最佳的配方,每一份努力只为让科研工作者更加简单,高效,稳定地获取珍贵的科研数据。

产品名称 货号 产品说明
Cell Counting Kit-8 (CCK-8) KTC011001 详情

本试剂盒检测非常便捷。试剂盒仅一管已经配制好的含有WST-8的CCK-8溶液,无须再进行任何配制等操作 。无须使用同位素,所有的检测步骤仅在同一块96孔板内完成。不必洗涤细胞,不必收集细胞,也不必采用额外的步骤去溶解formazan。可以用于大批量样品的检测。

【CCK-8】细胞增殖/毒性检测试剂盒综合对比

品牌/规格 Abbkine Dojindo Sigma
100次 200元 350 元 703.17 元
500次 640 元 892 元 2779.92 元
2000次 2050 元 ——

 

13899.6 元(3000次)
10000次 7180 元 8280 元 ——

实验注意事项:

  1. 建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK-8试剂后的培养时间。
  2. 有条件的情况下建议采用多通道移液器,可以减少平行孔间的差异。加入CCK-8试剂时,建议斜贴着培养板壁加,不要插到培养基页面下加,容易产生气泡,会干扰OD值读数。
  3. 白细胞可能需要培养较长时间。
  4. 当使用标准96孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1,000 个/孔 (100 μL 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 (100 μL 培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK-8溶液。
  5. 如果没有450nm的滤光片,可以使用吸光度在430-490 nm之间的滤光片,但是450nm滤光片的检测灵敏度最高。
  6. 如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK-8之前更换新鲜培养基,去掉药物的影响。当然药物影响比较小的情况可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。

更多详情:请浏览下方链接

CCK-8常见问题汇总:http://www.docin.com/p-1853035994.html

CCK-8实验操作指南:http://www.docin.com/p-18530

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