加入收藏 欢迎光临Abbkine Scientific Co., Ltd官方网站
登录 注册
中文
0

购物车

¥0

技术服务 | 你离高分文章只差一张荧光免疫印迹(Western Blot)结果图

发布时间:2020年06月18日 浏览次数:381

文章导读:

一:Western Blot概念

二:荧光WB和传统WB优势对比

三:荧光WB和传统WB结果图展示

四:Abbkine荧光WB和传统WB实验服务项目详情

五:与荧光WB对应的产品推荐

六:Abbkine公司简介

一:Western Blot概念

蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。

二:荧光WB和传统WB优势对比

常见Western Blot显色的方法主要有:放射自显影、底物化学发光ECL、底物DAB呈色。近年来随着凝胶成像仪器的升级,荧光WB技术开始显示超越传统WB的优势:

1)使用荧光二抗直接结合特异性一抗,无需使用胶片和显影液;

2)通过使用不同抗体和凝胶成像仪器可得到四重荧光图像,靶标蛋白浓度与荧光信号强度呈线性关系,实现真正的定量要求。

 

图1:荧光WB和化学发光WB原理图

 

荧光WB VS 化学发光WB:

化学发光法WB  荧光WB
信号源 酶促反应的间接信号(HRP酶标二抗+ECL显色) 荧光基团的直接信号(FITC/Dylight/Alexa Fluor荧光二抗)
信号持续时间 几分钟到几小时 几天到几周,避光保存得当可长达一年
灵敏度 高灵敏度,底物种类多样(DAB、ECL等)

例如ECL显色,HRP酶标二抗1:20000~1:50000

较好灵敏度

例如Dylight荧光二抗 1:10000左右

一致性 印迹间可能存在差异 印迹间的重复性较高
检测 胶片、化学发光法成像仪器

常见凝胶成像仪器均可

需有合适光源和滤光片的成像仪器,例如li-Cor、Bio-rad、天能等。
定量 单通道检测使标准化较为困难 带有内部对照的多重分析技术使标准化较易实现
其他注意事项 相似分子量需要进行剥离和印迹的重新检测

曝光时间可以较长

需要注意避免荧光背景

由于少量的激发光会穿过滤光片,因此曝光时间更长会导致背景荧光较高

注意避光

 

三:荧光WB和化学发光WB结果图展示

 

四:Abbkine荧光WB和化学发光WB实验服务项目详情

基于成熟的WB技术平台,Abbkine为客户提供WB蛋白质检测服务,服务内容包括样本蛋白提取及定量,SDS-PAGE分离蛋白样品,转膜,孵育抗体,ECL显色,扫描成像等,服务周期2-4周,只为加速您的科研进程!

货号 实验名称 需要客户提供 实验内容 交付明细 货期
SWB002 Western Blot蛋白质检测(荧光法) 1)样本:细胞106个,冰袋运输;组织100mg,干冰运输;蛋白,干冰运输;

特殊样本请询问;

2)一抗

样本蛋白提取及定量,SDS-PAGE分离蛋白样品,转膜,孵育抗体,

扫描成像。

完整实验报告,含实验步骤及结果分析。 2-4周,根据样本量定
SWB001 Western Blot蛋白质检测(化学发光法) 1)样本:细胞106个,冰袋运输;组织100mg,干冰运输;蛋白,干冰运输;

特殊样本请询问;

2)一抗

样本蛋白提取及定量,SDS-PAGE分离蛋白样品,转膜,孵育抗体,ECL显色,扫描成像。 原始扫描结果图、灰度值及Graphpad柱形图、完整实验报告,含实验步骤及结果分析。 2-4周,根据样本量定

 

五:与荧光WB对应的产品推荐

毋庸置疑,荧光二抗和荧光WB更配,适合做荧光WB的二抗有:

货号 品名 颜色展示 规格 价格(¥)
A23710 Dylight 680, Goat Anti-Mouse IgG 近红外 100/500ul 280/1120
A23720 Dylight 680, Goat Anti-Rabbit IgG 近红外 100/500ul 280/1120
A23910 Dylight 800, Goat Anti-Mouse IgG 远红外 100/500ul 280/1120
A23920 Dylight 800, Goat Anti-Rabbit IgG 远红外 100/500ul 280/1120
A23210 DyLight 488, Goat Anti-Mouse IgG 绿色 100/500ul 280/1120
A23220 Dylight 488, Goat Anti-Rabbit IgG 绿色 100/500ul 280/1120
A23410 Dylight 594, Goat Anti-Mouse IgG 橙红色 100/500ul 280/1120
A23420 Dylight 594, Goat Anti-Rabbit IgG 橙红色 100/500ul 280/1120

 

六:Abbkine公司简介

Abbkine专注于蛋白学和细胞学领域,致力于创新和研发各类抗体、蛋白质、分析试剂与试剂盒,以期成为生命科学研究发展、药物研发等领域的关键推动者。我们为您提供蛋白和免疫研究用户最喜爱的产品,从免疫学基础产品,如蛋白提取定量,到免疫学实验的内参标签抗体、一抗及二抗等;细胞研究用户最喜爱的产品,从用于检测细胞状态的染料及试剂盒,细胞器提取试剂盒,细胞亚结构染色示踪及细胞代谢检测产品,到用于细胞培养的细胞因子及蛋白类检测试剂盒,只为助力您的研究事业!

我们的定位:服务于细胞和蛋白研究全球用户,以应用流程和产品组合的方式为用户提供经济型和技术型的产品解决方案。

 

我们的使命:激发我们内在的创造力,提供有竞争力的生物医学产品和服务,持续为客户创造最大价值。

我们的愿景:成为受人尊重、世界一流的生物医学产品及服务供应商。

上一篇:已是最新文章

下一篇:已是最后文章

意见反馈
在线咨询
扫码关注

微信公众号

返回顶部