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IF实验新宠——Abbkine IF系列

发布时间:2022年09月01日 浏览次数:157

一、原理:

 免疫荧光技术(IF)是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素,制成荧光抗体,再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检测组织或细胞内的相应抗原(或抗体)的一门技术。

 

二、IF实验问题多

理想的IF实验结果:

样品的组织结构完整

图像清晰、分辨率高

荧光信号强、稳定

无非特异性染色

低背景

 

可是理想很丰满,现实很骨感

 背景深,可能原因:

  1. 封闭不充分没有封闭非特异性结合或封闭不充分,可使用二抗来源动物的非免疫血清进行封闭,改善封闭条件;
  2. 抗体浓度过高。一抗及二抗的浓度过高,建立浓度梯度预实验,在单染的体系里找到最佳抗体浓度;
  3. 洗涤不充分在洗涤缓冲液中加入0.2% Tween 20进行充分洗涤;
  4. 细胞培养过于密集若为细胞样本,优化细胞生长条件,找到最佳接种密度。

 

没有信号,可能原因

  1. 目的蛋白未表达。靶细胞中没有目标蛋白,建议做阳性对照,制备细胞裂解液,用Western Blotting验证目标蛋白在细胞中是否表达;
  2. 细胞通透性差。蛋白位于细胞质或者细胞核内,抗体不能穿透质、核膜,在封闭液和抗体稀释液中加入通透剂或增加通透剂作用时间或浓度,不行改用其它通透剂;
  3. 抗体浓度低。没有足够的一抗与目标蛋白结合,延长孵育时间,增加抗体浓度;
  4. 抗原表位被固定剂遮蔽。固定步骤遮蔽了抗体识别表位(使用福尔马林和 多聚甲醛固定剂),缩短固定时间,更换固定剂。

 

荧光淬灭快,可能原因

  1. 荧光素稳定性差。光稳定性较差,选用光稳定性好的荧光素二抗;
  2. 封片剂无抗淬灭作用。可选用防荧光淬灭剂封片。

 

基于传统的IF实验操作繁琐耗时、试剂用品种类繁多、实验结果稳定性可靠性差的痛点,Abbkine开发出通用型免疫荧光(IF)工具箱

 

产品亮点:

① 操作便捷无需操心复杂试剂,开盒即可开始实验;

② 组分齐全提供优化的抗体稀释液和 SuperKine™ 增强型抗荧光淬灭剂,抗淬灭效果强,维持极佳的荧光强度;

③ 高质量荧光二抗。提供 Dylight 系列二抗,具有更强的荧光强度和更高的光学耐受性及特异性。

 

Abbkine 抗荧光淬灭剂,产品优势特点:

① 兼容性高:精心优化配方可兼容多种荧光染料;

② 抗荧光淬灭强:封片后避光保存2周以上,仍可维持耀眼荧光;

③ 方便快捷:即用型无需配置,操作便捷;

④ 新颖包装:滴瓶包装设计,无需打开,挤压滴液,避免多次取用暴露污染。

图1. 抗荧光淬灭剂滴瓶包装外观

 

图2 . Abbkine抗荧光淬灭剂与其它品牌产品效果对比

 

图3. Abbkine 抗荧光淬灭剂0天与14天荧光效果对比

 

Abbkine IF系列试剂可免除IF实验后顾之忧配合使用增强型抗荧光淬灭剂让您的实验荧光更加耀眼夺目

 

产品推荐:

货号 名称 规格 价格
BMU104-CN SuperKine™ 增强型抗荧光淬灭剂 10 mL/50 mL ¥98/398
BMU107-CN SuperKine™ 增强型抗荧光淬灭剂(含DAPI) 10 mL/50 mL ¥98/398
KTD107-CN 通用型免疫荧光(IF)工具箱(抗兔Dylight 488) 100T ¥398
KTD108-CN 通用型免疫荧光(IF)工具箱(抗小鼠Dylight 488) 100T ¥398
KTD109-CN 通用型免疫荧光(IF)工具箱(抗兔Dylight 594) 100T ¥398
KTD110-CN 通用型免疫荧光(IF)工具箱(抗小鼠Dylight 594) 100T ¥398
A24211 IFKine驴抗小鼠IgG二抗,绿色荧光标记(IF实验优化) 100 µL/500 µL ¥498/1939
A24221 IFKine驴抗兔IgG二抗,绿色荧光标记(IF实验优化) 100 µL/500 µL ¥498/1939
A24421 IFKine驴抗兔IgG二抗,红色荧光标记(IF实验优化) 100 µL/500 µL ¥498/1939
A24431 IFKine驴抗山羊IgG二抗,红色荧光标记(IF实验优化) 100 µL/500 µL ¥498/1939
A24231 IFKine驴抗山羊IgG二抗,绿色荧光标记(IF实验优化) 100 µL/500 µL ¥498/1939
A24411 IFKine驴抗小鼠IgG二抗,红色荧光标记(IF实验优化) 100 µL/500 µL ¥498/1939
A24311 IFKine驴抗小鼠IgG二抗,橙色荧光标记(IF实验优化) 100 µL/500 µL ¥498/1939

 

我们将持续更新更多IF相关技术前沿资讯,敬请期待!

Abbkine的技术专家为了给广大读者提供学习生物知识的平台,经过不懈努力,将多种高端生物实验的干货整理出来,后期陆续在微信公众号中刊登,请广大热爱科学的读者持续关注Abbkine公众号。

 

细胞和蛋白研究工具(Cell and protein research tools)

Abbkine专注于蛋白学和细胞学领域,致力于创新和研发各类抗体、蛋白质、分析试剂与试剂盒,以期成为生命科学研究发展、药物研发等领域的关键推动者。我们为您提供蛋白和免疫研究用户最喜爱的产品,从免疫学基础产品,如蛋白提取定量,到免疫学实验的内参标签抗体、一抗及二抗等;细胞研究用户最喜爱的产品,从用于检测细胞状态的染料及试剂盒,细胞器提取试剂盒,细胞亚结构染色示踪及细胞代谢检测产品,到用于细胞培养的细胞因子及蛋白类检测试剂盒,只为助力您的研究事业!

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