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抗体稀释液,你最爱使用哪种?

发布时间:2021年04月29日 浏览次数:550

抗体稀释液,即用于稀释抗体的溶液,在进行抗原抗体反应如WB、ELISA、IF和IHC的实验中,用已经制备的抗体检测样本中的抗原(及其组成成分)。常用的抗体试剂的浓度(效价或滴度)很高,需要稀释合适的倍数后才可以用于检测抗原的试验反应中。传统的抗体稀释液常用的有:

1、脱脂奶粉

脱脂奶粉因便宜量多,一直是实验室的团宠。但因容易发霉变质,每次使用,需要更改新的抗体,不利于抗体的回收和保存;加上遇到溶解不充分和洗涤不干净,容易增加背景、拮抗抗原抗体结合,且不能用于磷酸化蛋白。

2、TBST

TBST 是Tris缓冲液,也是实验室常用的抗体稀释液,效价高的抗体会看到漂亮的条带,效价差的一抗或多抗,会清晰反映出非特异性结合条带,背景高,不能起到降低背景的作用。

3、PBST

PBS是磷酸盐缓冲液,不能用来稀释碱性磷酸酶(AP)标记的抗体,因为磷酸盐会抑制碱性磷酸酶活性。

4、BSA

牛血清白蛋白(BSA) 是牛血清的一种球蛋白。价格较高,一般有条件的实验室使用,BSA能起到封闭效果,减少抗体的非特异性结合。但售卖的BSA通常会有少量的抗体残留,会导致抗原/抗体之间的交叉反应,产生背景。

5、市售的抗体稀释液

市售的一抗或二抗稀释液,通常是经过不断优化的BSA,为保证稳定性会增加叠氮钠,但叠氮钠不能用来稀释辣根过氧化酶 (HRP)标记的抗体,因为叠氮钠会抑制HRP的活性,并且还含有毒性,影响人体健康。

在选择抗体稀释液需要注意:

1、脱脂奶粉不能用于磷酸化蛋白,保存时间短,颜色变绿,要更换新的抗体,昂贵的抗体不建议使用。

2、PBST不能用来稀释碱性磷酸酶(AP)标记的抗体,含AP标记的二抗不能使用PBST稀释。

3、抗BSA的抗体不能使用含BSA的抗体稀释液,能与BSA结合的抗体,会发生交叉反应,产生背景。

4、含有叠氮钠的市售抗体稀释液,不能用来稀释辣根过氧化酶 (HRP)标记的抗体,且有毒,用时小心。

5、对于初次使用抗体时,TBST更安心。

传统的抗体稀释液有这么多局限性,那有没有通用型的抗体稀释液,可以适用于磷酸化,AP、HRP等偶联的抗体,并且在降低背景的同时,有增强信号的作用,无需烦恼选用哪种抗体稀释液,也不用再在丁香园、小木虫等网站求助。

为了解决这个问题,Abbkine研发团队通过不断尝试和创新,研发出增强型抗体稀释液—BMU103-CN  SuperKine™ 增强型抗体稀释液,不仅有增强抗体的效果,且无蛋白,纯化学试剂成分,适用AP,磷酸化,HRP等偶联的抗体。本品有一定的保存效果,且不含磷酸盐、叠氮钠等成份,含有的抗体结合增强成份,可有效增强抗原与抗体的结合反应,减少抗体使用量,以节约抗体。

纯化学成分—— 无动物蛋白,无抗原抗体交叉反应风险。

信号增强——含有抗体抗原结合增强成份,且无磷酸盐。

节时快捷——孵育1h就可以达到很强的效果,无需过夜,实现1天能做完WB的梦想。

兼容性好——兼容辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶和生物素标记的二抗。

安全无毒——加入新型的防腐剂,无叠氮钠,无毒健康,使用安心。

即用溶液——无需稀释,直接使用。

适用广泛——适用于多种免疫检测实验(WB、IHC、ELISA、IF)。

增强型抗体稀释液

以NF-κB为例,看下效果:

Superkine™ 增强型抗体稀释液(BMU103-CN)与普通抗体稀释液(TBST)以及同级竞品(B品牌)进行对比WB实验

图:Superkine™ 增强型抗体稀释液(BMU103-CN)与普通抗体稀释液(TBST)以及同级竞品(B品牌)进行对比WB实验

蛋白样品:HEK293细胞;

一抗(NFkB 小鼠单克隆抗体, ABM0017,1:5000)溶液室温孵育1 h,TBST洗涤;

二抗(辣根过氧化物酶标记山羊抗鼠IgG, A21020,1:10000)溶液室温孵育1 h,TBST洗涤;

ECL发光液(超敏型ECL发光液(飞克级)货号:BMU102-CN)孵育1-2 min,然后曝光相同时间成像。

注意事项:抗体稀释的浓度依据自己的实验自己摸索的,不同实验中,不同抗体稀释倍数不同。

看到如此好的一款产品,你是不是心动了!如果你仅仅是心动却不敢行动,可以来试试我们的试用装呀!

2021年4月15日-2021年12月31日,Abbkine会免费为各位小伙伴们送去好用的试用装,短小精干,却潜力无穷,备受Abbkine新老客户们的喜爱。试用装的详情如下:

货号 名称 试用装规格
BMU101-s SuperKine™ 增强型ECL发光液(皮克级) 6 mL
BMU102-s SuperKine™ 超敏型ECL发光液(飞克级) 6 mL
BMU103-s SuperKine™ 增强型抗体稀释液 20mL

现在拨打Abbkine热线电话:027-59716789,或者在本篇文章下留言告诉我们试用装需求,即可免费获得试用装。您试用满意后,再下单购买这四款炙手可热的新品,机不可失,时不再来,百万试用装等你来拿。

如果文字不能让你很直观的认识Superkine™ 增强型抗体稀释液,我们还为你准备了图片哟!

Superkine™ 增强型抗体稀释液宣传图

Abbkine成立于2012年,Abbkine Scientific始终倾听客户需求,持续开发创新的生物试剂产品,以期成为生命科学和药物研发等领域的关键推动者。作为全球唯一的细胞和蛋白领域的产品组合供应商,通过产品创新和精益运营,Abbkine提供从蛋白提取纯化、免疫检测到细胞培养分离、代谢分析等领域的基础性工具和解决方案,致力于客户的成功和卓越。

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