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内参专题|你的内参真的选对了吗?

发布时间:2022年05月19日 浏览次数:260

众所周知,内参就是内部参照,一般是指管家基因编码表达的蛋白,它们在各个组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照。内参则可以校正蛋白质定量、上样过程中存在的误差,保证实验结果的准确性。但是在实际操作中,很多小伙伴们在选择内参的时候,就遇到了难题:

  1. 选择的内参与自己的样本种属不匹配;
  2. 内参分子量与靶蛋白太相近,导致无法通过裁膜把内参条带与靶条带分开;
  3. 做亚细胞定位的蛋白中,自己选择的内参并非最佳;
  4. 特殊处理的样本,内参信号悄悄发生了改变,影响了实验结果的判断。

为此,Abbkine 提供全套单克隆、多克隆的内参抗体和内参鸡尾酒套装组合,高特异性和多种应用类型,可满足您绝大多数的蛋白质定性,定量和定位分析。 除了常见的人、小鼠、大鼠, 我们还提供更多其它物种的内参抗体,以及大包装定制服务。

如何选择合适的内参抗体?

内参抗体种类繁多,因此,为您的实验选择一个合适的内参抗体,至关重要!

  1. 考虑样品种属。对于哺乳动物的组织和细胞,常用的内参蛋白为 β-actin, Tubulin, GAPDH, Lamin B1, PCNA, Na+/K+-ATPase等;对于植物样品,常用的是 Plant actin 和Rubisco。
  2. 考虑目的蛋白分子量。选择的内参蛋白应与目的蛋白有不同的分子量(>5 KDa),以便区分目的蛋白条带。对于高分子量的蛋白质(超过100 kDa),我们推荐客户使用Vinculin 作为内参。
  3. 考虑目的蛋白的表达定位,选择对应的内参,比如全细胞,细胞核,线粒体,细胞膜等等。
  4. 在某些特定的条件下,内参蛋白的表达会出现异常,应该将其考虑在内。

这个时候有小伙伴就会来问了:“既然选择正确的内参抗体如此复杂,那么有没有一款产品买了之后能解决我们80%的样本内参检测问题呢?”为了满足广大“因粉”的实验要求,以一站式服务满足大家的需求,在亚科因科研专家们孜孜不倦的努力下,我们开发了一款通用型内参抗体鸡尾酒套装,更深入了解该产品,以及在实验过程中规避实验误区,我们进行了实验过程中可能遇到的问题汇总,大家快来康康。

一、问:什么是通用型内参抗体鸡尾酒套装?

通用内参抗体鸡尾酒套装提供一种全面细致的方法,快速便捷地检测多种样品中内参蛋白的含量。

二、问:该试剂盒内的组分WB阳性对照样本有什么作用?

阳性对照裂解物用来表明实验是有效的,并且是正确的,即可证明目标蛋白不在样本中表达。当设定一个新实验时,我们强烈推荐使用阳性对照裂解物,这将提高实验的可信度。

三、问:为什么要设置这三种内参组合成鸡尾酒?

经由上百篇文献引用的经典的GAPDH、β-Actin和β-Tubulin是三种最常用的内参抗体,可用于包括人、小鼠、大鼠等常见种属样本,广泛应用于不同样本类型和分子量大小的内参对照。

四、问:该试剂盒内组分是否可以拆开单独使用?

可以,该试剂盒内组分可以分别应用于它们各自对应的实验,套装内组分相对应产品(ABL1010ABL1020ABL 1030BMU103-CN)也可单独订购。

五、问:该试剂盒内有哪些优势特点呢?

  1. 1. 应用广泛。提供三种最常用的内参抗体,可应用于不同样本类型和分子量大小的内参对照,免除您选择内参的烦恼。
  2. 2. 提供 WB 阳性对照。可直接上样,WB 实验操作更省心。
  3. 3. 提供即用型抗体稀释液。提升目的条带信号,排除背景干扰,让 WB 实验操作更轻松。
  4. 4. 本套装经独特的专利设计,以获得独一无二的 WB 内参体验。

五、问:说的这么心动,我如何购买?

目前全球大部分地区都有代理商,您可以到Abbkine微信公众号或www.abbkine.cn查询当地代理商信息,也可以和我们联系。心动不如行动,现在还有精彩活动等着您哦。

产品推荐:

产品名称 货号 规格 价格 ( 元 )
通用内参抗体鸡尾酒套装 KTD101-CN 1 Kit 798
β-Actin小鼠单克隆抗体(1C7) ABL1010  50 uL/200 uL/200 uL *5 498/898/3998
GAPDH小鼠单克隆抗体(2B5) ABL1020 50 uL/200 uL/200 uL *5 498/898/3998
β-Tubulin小鼠单克隆抗体(3G6) ABL1030 50 uL/200 uL/200 uL *5 498/898/3998
SuperKine™ 增强型抗体稀释液 BMU103-CN 100 mL /500 mL 198/598

 

为了广大“因粉”的厚爱,我们还会整理出更多的实验方法FAQ给大家学习和参考。同时,Abbkine的技术专家为了给广大读者提供学习生物知识的平台,经过不懈努力,将多种高端生物实验的干货整理出来,后期陆续在微信公众号中刊登,请广大热爱科学的读者持续关注Abbkine公众号。

Abbkine专注于蛋白学和细胞学领域,致力于创新和研发各类抗体、蛋白质、分析试剂与试剂盒,以期成为生命科学研究发展、药物研发等领域的关键推动者。我们为您提供蛋白和免疫研究用户最喜爱的产品,从免疫学基础产品,如蛋白提取定量,到免疫学实验的内参标签抗体、一抗及二抗等;细胞研究用户最喜爱的产品,从用于检测细胞状态的染料及试剂盒,细胞器提取试剂盒,细胞亚结构染色示踪及细胞代谢检测产品,到用于细胞培养的细胞因子及蛋白类检测试剂盒,只为助力您的研究事业!

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