| 产品英文名称 | ExKine™ Pro Total Protein Extraction Kit for Plant Tissues |
| 实验建议 | Abbkine的ExKine™ Pro植物组织总蛋白提取试剂盒（柱式法），提供了一种简单、便捷的从植物组织中抽提总蛋白的方法。 |
| 试剂盒组分 | • Denaturing Cell Lysis Buffer • Protein Extraction Filter Cartridge • Collection Tube with Cap • Plastic Rod |
| 特点&优势 | • 方便快捷：一“柱”到底，全程8分钟。 • 多用途：适用样本齐全，植物组织叶片、种子、软茎、根。 • 蛋白得率高：从50-200 mg植物组织提总蛋白，得率可达2-8 mg/mL。 • 操作简易：无需液氮研磨，优化的裂解缓冲液更加高效提蛋白。 • 兼容性好：所得蛋白可用于SDS-PAGE和WB等下游实验。 |
| 使用中注意事项 | 1. 蛋白酶抑制剂不是必须加入，但是如果下游实验需要较长时间或者蛋白提取后保存较长时间，建议添加蛋白酶抑制剂，使用BCA法测定蛋白浓度，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。研究蛋白磷酸化，磷酸酶抑制剂应在使用前加入Denaturing Cel Lysis Buffer。 2. WB上样前，仍需和 Loading Buffer 混匀煮制样品。 3. Plastic Rod可以重复使用，用去离子水彻底冲洗干净，用纸巾擦干。 4. 若蛋白浓度较低，可增加组织的质量或减少Denaturing Cell Lysis Buffer的体积。 5. 部分未完全裂解的组织不会影响样品质量。 |
| 保存建议 | 常温保存12个月。 |
| 运输条件 | 常温运输 |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
| 背景 | ExKine™ Pro植物组织总蛋白提取试剂盒（柱式法），是新一代超快速蛋白质提取工具。越来越多的证据表明最常用的RIPA缓冲液可能导致蛋白质的随机损失，产生很多难以解释的疑难数据。ExKine™ Pro植物组织总蛋白提取试剂盒（柱式法）使用离心管柱提取技术结合优化的裂解缓冲液可以更快速、更有效地提取总蛋白，无需液氮研磨，使WB结果更加准确。 |
Fig 1. Total proteins were extracted from different plants (Oryza, Arabidopsis). Lane left, proteins extracted by Abbkine Assay Kits. Lane right, proteins extracted by B-brand Assay Kits. After blocking, incubate with primary antibody (A01050, 1:5000), incubate secondary antibody (A21010，1:10000), Chemiluminescence (BMU101-CN).
Fig 2. Total proteins were extracted from different plants (Arabidopsis, Soybeans). Lane left, proteins extracted by Abbkine Assay Kits. Lane right, proteins extracted by B-brand Assay Kits. After blocking, incubate with primary antibody (A01070, 1:5000), incubate secondary antibody (A21010，1:10000), Chemiluminescence (BMU101-CN).
Fig 3. Total proteins were extracted from different plants (Oryza, Arabidopsis). Lane left, proteins extracted by Abbkine Assay Kits. Lane right, proteins extracted by B-brand Assay Kits. After blocking, incubate with primary antibody (A01110, 1:5000), incubate secondary antibody (A21010，1:10000), Chemiluminescence (BMU101-CN).
Fig 4. Plant protein profiles extracted by denaturing cell lysis buffer (Abbkine KTP3008). Extracted proteins were separated in 12% SDS-PAGE and stained with coomassie blue (BMU105-CN). Lane 1, soybean; lane 2, maize; lane 3, spinach; lane 4, Arabidopsis.
植物叶片样品（叶片，种子，软茎和根）：取 50-200 mg 新鲜组织，剪碎，卷起或者折叠减小体积放入离心管柱套管中，研磨（样本尽量新鲜）。 种子样品（新鲜或冷冻）：干燥的种子样品需要在水中浸泡1-2天。 软茎，用锋利的刀片将其切成小块放入离心管柱套管中，研磨。
植物组织总蛋白提取试剂盒（柱式法）提供的裂解液为变性裂解液，所以提取的是变性蛋白，不具有生物活性，不能进行酶活分析。
在该试剂盒操作中，采用一步法提取植物蛋白，不涉及蛋白酸碱度变化，提高蛋白的溶解性。
通过裂解缓冲液中的表面活性剂对样本细胞进行裂解，金属螯合剂与蛋白结合得到粘性细胞裂解产物。将粘性细胞裂解物产转移至过滤装置内，通过离心，使粘性细胞裂解物通过过滤装置。再利用过滤装置内的多孔过滤介质使粘性细胞裂解产物中的DNA、RNA、脂质和其他细胞组分截留在过滤管内，而蛋白质可以通过过滤管进入收集管，完成蛋白质提取的操作。
可以提取，裂解液中的可溶性蛋白都可以透过滤芯，进入收集管中。
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