KTB1115-CheKine 亚铁离子含量检测试剂盒基本原理
KTB1115-CheKine 亚铁离子含量检测试剂盒基本原理
(一)核心化学反应机制
CheKine 试剂盒主要基于显色反应原理实现对亚铁离子的检测。试剂盒中包含一种特殊设计的显色剂,该显色剂能够与亚铁离子发生特异性络合反应。其分子结构中含有特定的官能团,这些官能团能够与亚铁离子形成稳定的络合物。在反应过程中,亚铁离子的外层电子云与显色剂的官能团相互作用,发生电子转移和轨道杂化等一系列微观过程,从而形成具有特定结构和性质的络合物。这种络合物具有独特的吸收光谱特性,在特定波长下表现出强烈的光吸收。
(二)检测波长的确定及依据
经过大量的光谱学研究和实验验证,确定了该络合物的最大吸收波长。通常情况下,该络合物在 562nm 波长附近具有显著的光吸收峰。选择这一特定波长进行检测,主要基于以下几方面考虑。一方面,在此波长下,络合物的吸光度与亚铁离子浓度呈现良好的线性关系,符合朗伯 - 比尔定律(A = εbc,其中 A 为吸光度,ε 为摩尔吸光系数,b 为光程,c 为物质浓度),这为通过检测吸光度来准确计算亚铁离子浓度提供了理论依据。另一方面,在该波长下,细胞样本中常见的其他物质,如蛋白质、核酸、糖类等,对光的吸收较弱,不会对亚铁离子 - 显色剂络合物的吸光度产生明显干扰,从而保证了检测的特异性和准确性。
(三)干扰因素及排除机制
尽管 CheKine 试剂盒具有较高的特异性,但在实际检测过程中,细胞样本中的一些金属离子(如铜离子、锌离子等)可能会对检测结果产生干扰。为了排除这些干扰因素,试剂盒中添加了特殊的掩蔽剂。这些掩蔽剂能够与潜在干扰离子发生优先反应,形成稳定的络合物或沉淀,从而将干扰离子从检测体系中去除。例如,对于铜离子的干扰,掩蔽剂能够与铜离子形成一种无色且稳定的络合物,使其无法与显色剂竞争结合亚铁离子,同时该络合物在检测波长下无明显光吸收,不会影响对亚铁离子的检测。这种巧妙的设计极大地提高了试剂盒在复杂细胞样本检测中的可靠性。
技术支持
亚科因(武汉)生物技术有限公司
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