做转录调控、启动子 /miRNA 验证

双荧光素酶实验总踩坑？

Abbkine 双荧光素酶报告基因检测试剂盒（货号：KTA8010）

10 个科研人高频疑问，一次性说清！

新手也能稳出漂亮数据

✨Q1：试剂盒是闪光型还是辉光型？

✅ 高灵敏闪光型

信号强、响应快、检测范围广，无细胞内源活性干扰，适配主流发光仪 / 酶标仪

Q2：可检测哪些样本？

✅ 多样本通用

贴壁 / 悬浮细胞、原生质体、植物叶片，一套搞定多种实验

Q3：海肾荧光素酶检测底物的作用是什么？

✅ 抑制干扰 + 精准检测二合一

不但可以强效抑制萤火虫荧光素酶活性、消除交叉信号干扰，还能特异性催化反应，精准检测出海肾荧光素酶活性。

Q4：萤火虫 & 海肾要分孔检测吗？

✅ 同一孔即可双测

海肾底物自带高效淬灭剂，先测萤火虫、再测海肾，信号无干扰，省样更精准！

Q5：只测海肾，能跳过萤火虫步骤？

❌ 不可以

需按先萤火虫、后海肾顺序检测，保证体系完整，结果更可靠

Q6：贴壁细胞易飘，可不用PBS清洗直接弃上清加裂解液吗？

✅ 可直接弃上清加裂解液

操作时轻柔吸弃培养基，尽量减少残留，再加入足量裂解液裂解即可，不影响后续检测结果，同时避免 PBS 清洗导致的细胞脱落损失。

Q7：细胞裂解液能冻存吗？

✅ 可长期冻存

-80℃可存半年，-20℃可存 1 个月，复融至室温即可检测，不影响结果

Q8：底物需要全程避光吗？

✅ 操作不避光，保存需避光 + 低温

萤火虫工作液建议 - 80℃分装，避免反复冻融损失活性

Q9：实验必须在冰上操作吗？

✅ 无需冰上操作

20-25℃室温最佳，避免高温缩短信号半衰期，操作更省心

Q10：内参 & 目的质粒共转比例怎么调？

✅ 预实验梯度推荐（海肾：萤火虫）

1:10、1:20、1:50、1:100，萤火虫信号＞海肾信号更优