揭秘迁移/侵袭实验,为您的细胞研究保驾护航
细胞迁移与侵袭实验将Transwell小室放入培养板中,小室内称上室,培养板内称下室,上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔,将研究的细胞种在上室内,由于聚碳酸酯膜有通透性,下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞,应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜,就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。
对于细胞迁移与侵袭实验,对于很多细胞实验爱好者来说也许至今迷雾重重,其中最让人迷惑不解的可能包括如下几个方面:
1. 细胞迁移与侵袭实验听起来比较相似,它们存在哪些差异?
2. 做细胞迁移和侵袭实验的实际应用有哪些方面?
3. 做细胞迁移和侵袭实验时,如何控制细胞个数?
4. 如何确定细胞侵袭实验的培养时间?
下面Abbkine专家为您解密:
Q1:细胞迁移与侵袭实验有什么区别?
A1:细胞迁移是细胞在化学信号(如:趋化因子)的驱使下沿着浓度梯度从一个区域转移到另一区域的运动。损伤修复、细胞分化、胚胎发育以及恶性肿瘤转移等诸多生理/病理过程都需要通过细胞迁移来完成。细胞的迁移性,一般来说,是指细胞受到外来信号的刺激,由一个地方迁移到了另一个地方的特性,通常发生在比如伤口愈合,细胞分化,胚胎发育和肿瘤转移的过程中。
细胞侵袭与细胞迁移比较类似,但是"侵袭"需要细胞穿过胞外基质层(ECM)或基底膜基质层(BME),在这个过程中细胞先酶解去除ECM/BME的阻碍,从而在趋化因子浓度梯度驱使下完成从一处到另一处的移动。细胞侵袭可以发生在正常细胞的炎症反应过程中,也常发生在恶性肿瘤细胞的转移过程中。因此,研究其中的机制对多种生理/病理过程都有着重要的意义。
Q2:迁移、侵袭实验的大致步骤是怎样的?
A2:Transwel小室产品可为迁移、侵袭实验构建绝佳的研究模型。您可将待研究的细胞接种在Transwel/Insert小室的微孔膜上,在上下室分别加入含有不同浓度的趋化因子的培养基;细胞在迁移、侵袭实验时,受到趋化因子的吸引,会挤压自身以穿过膜上的小孔,并在膜的背侧贴附下来。实验结束后,您可统计穿过膜的细胞的情况来评价迁移/侵袭实验。
与迁移实验不同的是,侵袭实验中需要在微孔膜上额外包被一些基质蛋白(ECM/BME), 如胶原、纤粘蛋白、层粘连蛋白等,Matrigel产品也被非常广泛地应用在侵袭实验中。
Q3:做细胞迁移和侵袭实验的实际应用有哪些方面?
A3:应用关键词:化妆品,抗癌药物,促愈合药物,干细胞、肿瘤研究;
专业领域:胚胎发育、血管生成、伤口愈合、免疫反应、炎症反应、动脉粥样硬化、癌症转移。
Fig1 细胞划痕实验
Fig2 胚胎定向发育
Q4:做细胞迁移和侵袭实验时,如何控制细胞个数?
A4:如何控制细胞个数成为众细胞工作者面临的难题,下面给大家介绍几个细胞定量简单易行的方法:
1. 血球细胞计数板法:
血球计数板是一种常用的细胞计数工具,医学上常用来计数红细胞、白细胞等而得名,也常用于计算一些细菌、真菌、酵母等微生物的数量,是一种常见的生物学工具。显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上(又称计菌器),于显微镜下直接计数,然后推算出含菌数的一种方法。血球计数板是常用的计菌器之一。
2. 细胞计数仪检测法:
随着生物学技术的快速发展,自动化代替手工的社会,速度和效率是社会关注的重点。全自动细胞计数分析仪也是顺应时代的要求,应广大研究者和科学领域的需求上市的。
a. 要考虑细胞计数仪的性价比:如果您的目的只是代替手工计数,节省操作者的时间,操作简便,完全没有必要花几十万买一台仅能进行细胞计数的仪器,花大钱办小事。
b. 要考虑细胞计数仪的稳定性和重复性:如果您对细胞计数的准确性和重复性要求高,那仪器的高性能和稳定性是首要考虑因素,仪器的硬件以及配套软件的稳定都要考虑,不能一味的追求低价格。
c. 要考虑根据细胞类型选择适合的型号:如果您的样本是原代细胞,背景复杂,红细胞和血小板污染严重,你又希望快速精确计数有核细胞且进行精确细胞活力分析,计数结果的准确性直接影响后续实验的成功和重现性。那么这时就不要吝啬你的钱,双荧光细胞计数&活力分析仪将是您值得花血本来装备的。
d. 要考虑实验室多功能检测需求:如果细胞计数和活力分析只是实验室的部分需求,而实验室还要进行凋亡、细胞周期、GFP等功能检测,且实验室也无配套的仪器,那为实验室装备一款多功能的细胞计数仪是您的最佳之选,可以解决您到其他实验室求助,四处碰壁的境况,还可以轻松、简单、随时亲自操作获得理想结果。
Q5:如何确定细胞侵袭实验的培养时间?
A5:培养时间主要根据细胞侵袭能力和细胞数量而定,建议通过预实验选择合适的培养时间。
Q6:如何选择用于迁移/侵袭实验的产品?
A6:Transwel小室主要的两种膜材质聚碳酸酯(Polycarbonate, PC)和聚酯(Polyesteror Polyethylene Terephthalate, PET) 均可用于迁移、侵袭实验。
Abbkine品牌的细胞迁移/侵袭产品膜材质均为聚碳酸酯膜(8 µm 孔径)。如下为经过细心优化的Abbkine产品。
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细胞迁移侵袭技术还有很大的发展空间,将来会应用到更多的实验领域,在生物行业发展中具有举足轻重的地位,正持续获得越来越多生物学家的关注。
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赋能细胞研究与治疗 Enabling cell research and therapy
亚科因生物技术有限公司(Abbkine Biotechnology Co., Ltd)成立于2017年,总部位于中国武汉。公司致力于细胞科研检测及细胞治疗领域关键试剂的研发、生产和销售,成为全球细胞制药领域创新的关键推动者。公司主营业务包括细胞培养、扩增及储存试剂,细胞代谢、检测及分选试剂盒,细胞治疗用原料及细胞因子等产品及定制化服务。围绕生物试剂研发,亚科因生物已建立了稳定完善的两大关键技术平台:生化试剂配方和重组蛋白表达进化平台,为细胞科研检测及细胞治疗核心试剂的高通量、高效率研发生产提供保障。