报告基因是指转染后易于检测产物的基因，可作为标记物用于筛选成功转染的细胞，用于研究基因表达调控，或作为对照用于对转染效率进行标准化。其中，荧光素酶的应用较多，包括萤火虫荧光素酶（Firefly luciferase，FLUC）和海肾荧光素酶（Renilla luciferase，RLUC）等。

双荧光素酶报告系统优势特点：

1. 萤光素酶和海肾萤光素酶种源同源性并对应不同的反应底物，故无交叉干扰。

2. 以Luciferase为核心，构建研究对象到相应位置，得出基因表达量，确定构建序列的功能，数据真实。

3. 双报告基因则通过共转染的“对照”作为内参为试验提供一基准线，在最大程度上减小细胞活性和转染效率等外在因素对实验的影响，使得结果更为可信。

双荧光素酶报告系统主要有5个应用方向：

验证microRNA同mRNA靶向互作。将待测基因的3’UTR序列插入报告基因载体，再共转入该microRNA，检测荧光素酶活性下降，则提示为其靶序列。

验证microRNA同lncRNA靶向互作。将待测lncRNA序列插入报告基因载体的3’UTR区域，检测荧光素酶活性。

启动子结构分析。将启动子区域(约2k左右)进行分段截短或突变，构建入报告基因载体，检测荧光素酶活性。

启动子SNP分析。一些基因的启动子区域存在单核苷酸多态性，可运用荧光素酶报告系统分析其相对活性。

验证信号通路是否激活。将该信号通路的下游相应元件序列构建入报告基因载体，检测不同上游条件下，其荧光素酶活性，即下游信号通路的响应情况。

荧光素酶报告基因以具有检测快速、灵敏度高、线性范围广，且在大多数哺乳动物细胞无内源性表达等诸多优点而备受青睐。因此，我们同步设计了两款试剂盒，针对不同的客户需求，两款试剂盒比较如下：

对不同品牌荧光素酶报告基因检测试剂盒的稳定性和适用样本类型，经过对比发现Abbkine试剂盒适用样本广泛，稳定性高。

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A：Calcein AM 与L929细胞进行孵育，细胞质包括线粒体发出强绿色荧光；

B: 细胞进一步与CoCl2 孵育以后，细胞质内Calcein的绿色荧光被CoCl2淬灭，仅留下线粒体内的绿色荧光；

C: 使用Ionomycin (0.25μM)处理细胞，诱导细胞外的Ca2+大量进入细胞内，过多的Ca2+进入线粒体基质，导致MPTP的开放，使部分Calcein从线粒体内释放，同时使钴离子进入线粒体内并导致Calcein的绿色荧光淬灭。

经过对比，我们不难发现，Abbkine线粒体通透性转换孔(MPTP)检测试剂盒具有以下明显优势：

1、荧光亮度高（A)；

2、准确性高：CoCl2和离子霉素淬灭率高(B和C)。

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