加入收藏 欢迎光临Abbkine Scientific Co., Ltd官方网站全国服务热线:400-6800-830
登录 注册
中文

亚科因(Abbkine)—服务于细胞和蛋白研究全球用户

【干货分享】如何诱导巨噬细胞极化

发布时间:2024-05-28 浏览次数:1164

巨噬细胞是机体内非常重要的一类免疫细胞,也一直是科研工作者们的研究热点,尤其是巨噬细胞的极化,本期我们将重点讲述如何诱导巨噬细胞极化。

 

当机体内环境稳态遭到破坏时,巨噬细胞通过吞噬、释放炎症因子等作用清除外源微生物,以恢复机体动态平衡,这个过程称为活化。伴随着活化,在细胞因子的作用下,巨噬细胞改变其表型,以增强应对微环境变化的能力,该过程为巨噬细胞的极化。

 

极化使得巨噬细胞向不同的方向分化,呈现出不同的表型,发挥不同的功能。目前巨噬细胞的极化包括两个极端,即经典活化的M1型巨噬细胞和替代性活化M2型巨噬细胞。巨噬细胞的极化对防御病原体、调节炎症、修复组织和维持体内平衡的稳定有着十分重要的作用。

 

诱导巨噬细胞M1极化

所需诱导因子:IFN-γLPSGM-CSF

诱导巨噬细胞M2极化

所需诱导因子:IL-4IL-13IL-10M-CSFTGF-β

 

以人外周血向巨噬细胞的极化为例

单核细胞样本准备

从外周血中分离PBMCs,可使用人淋巴细胞分离液进行此步;

PBMCs中分离单核细胞,可使用CD14单核细胞磁珠分选试剂盒进行此步

获得成熟巨噬细胞

调整单核细胞浓度为1-2×10^6/ml(可参考文献),在RPMI1640培养基(含20 % FBS中添加M-CSF100 ng/ml)诱导单核细胞向巨噬细胞的成熟

7天左右分化成熟为巨噬细胞(贴壁),可选择CD68+表达作为鉴定巨噬细胞成熟的标志蛋白


1. 诱导单核细胞向巨噬细胞的成熟

诱导向不同方向的极化

将成熟的巨噬细胞消化下来,重新铺板,诱导48h实现M1M2的极化:

M1极化因子:LPS100 ng/ml+ IFN-γ20 ng/ml

M2极化因子:IL-4IL-10IL-1320 ng/ml


2. 诱导成熟巨噬细胞M1M2的极化

极化的鉴定

刺激48小时后,用流式的方法检测极化后M1M2标志蛋白的表达。M1巨噬细胞上调表达CD86MHCⅡCD80CD274等,M2巨噬细胞上调表达CD206CD163

参考文献

Blood. 2013 Dec 12;122(25):4054-67. doi: 10.1182/blood-2013-05-501494. Epub 2013 Oct 30


 

产品推荐(点击货号进入产品页)

 

产品编号

产品名称

规格

PRP1137

Mouse IL-4 protein

5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

PRP1055

Human IL-10 protein

5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

PRP1051

Human IL-13 protein

5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

PRP1050

Human IFN-γ protein

20 μg/100 μg/500 μg/1 mg

PRP1936

Human M-CSF Protein, His tag (Animal-Free)

5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

PRP1016

Human GM-CSF protein

5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

PRP1136

Mouse M-CSF protein

5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

PRP1048

Human TGF-β protein

5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

PRP1151

Recombinant GM-CSFMouseAF

5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

PRP3001

Ulp1 (SUMO Protease /Ulp1 peptidase)

500 U/1000 U/5000 U

PRP3002

Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (TdT)

40 μg/100 μg

PRP3003

Human Annexin V/ANXA5 protein

100 μg/1 mg/10 mg

PRP3004

Luciferase firefly

5 mg/25 mg

PRP1068

Human FGF-2154 aaprotein

20 μg/100 μg/500 μg/1 mg

PRP1138

Mouse IFN-γ

20 μg/100 μg/500 μg/1 mg

PRP1085

Human IL-4 Protein, His tag (Animal-Free)

5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

PRP1049

Human EGF protein

100 μg/500 μg/1 mg/10 mg

PRP1158

Mouse IL-1 beta Protein, His tag (Animal-Free)

5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

PRP1114

Mouse RANKL protein

2 μg/10 μg/100 μg/1 mg

PRP1171

Mouse/Rat TGF beta 1, His tag (Animal-Free)

5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

PRP1113

Mouse TNF-α protein

5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

PRP1087

Human IL-6 Protein, His tag (Animal-Free)

5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

PRP1060

Recombinant IL-1 betaHumanAF

5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

PRP1056

Huamn RANKL protein

5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

PRP1054

Human VEGF165 protein

5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

 

欢迎广大蝌蚪们多多关注Abbkine公众号,还会有更多科研惊喜等着大家哟。同时,Abbkine的技术专家为了给广大读者提供学习生物知识的平台,经过不懈努力,将多种高端生物实验的干货整理出来,后期陆续在微信公众号中刊登,请广大热爱科学的读者持续关注Abbkine公众号。

 

Abbkine致力于为广大科研用户提供高品质,高性价比的科研试剂!

 想要了解更多实验干货,敬请关注Abbkine 微信公众号及视频号!

 我们将持续更新更多技术前沿资讯,敬请期待!



赋能细胞研究与治疗 Enabling cell research and therapy

亚科因生物技术有限公司(Abbkine Biotechnology Co., Ltd)成立于2017年,总部位于中国武汉。公司致力于细胞科研检测及细胞治疗领域关键试剂的研发、生产和销售,成为全球细胞制药领域创新的关键推动者。公司主营业务包括细胞培养、扩增及储存试剂,细胞代谢、检测及分选试剂盒,细胞治疗用原料及细胞因子等产品及定制化服务。围绕生物试剂研发,亚科因生物已建立了稳定完善的两大关键技术平台:生化试剂配方和重组蛋白表达进化平台,为细胞科研检测及细胞治疗核心试剂的高通量、高效率研发生产提供保障。

意见反馈
在线咨询
扫码关注

微信公众号

返回顶部